ATCC培养基的制备涉及到几个关键的步骤,包括准确称量试剂、调节pH值、过滤、分装、灭菌等。
在制备培养基时,需要根据不同的菌类和用途选择适宜的培养基,将必需的试剂进行严格称量,并确保所有化学药品的纯净和准确。培养基的各种成分需放入容器内加热溶解,补充水分后测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计进行测定,并用1N NaOH和1N HCl调节至适宜范围内。
将溶解的培养基通过过滤装置进行过滤至透明,以去除不溶物和杂质。然后将过滤后的培养基分装于试管或三角瓶内,塞好棉塞,用牛皮纸包扎好,准备灭菌。培养基的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法。
ATCC培养基的存放要求包括温度控制、避免污染、防止光照和保持密封等。这些存放条件对于确保培养基的品质和有效性至关重要。以下将详细阐述这些存放要求:
1.温度控制
冷藏保存:大多数ATCC培养基需要冷藏保存,一般温度控制在2-8℃。这有助于延长培养基的有效期,同时减缓微生物污染的风险。
特定温度:对于某些特殊培养基,可能需要在室温或其他特定温度下保存,这取决于培养基的配方和使用要求。
2.避免污染
无菌操作:在打开培养基容器之前,需要进行无菌操作,避免微生物污染。操作过程中应保持手部和环境的清洁。
密封存放:未开封的培养基应保持在原包装中密封存放,一旦打开,应将剩余培养基迅速密封并放回冷藏环境。
3.防止光照
避光保存:部分培养基成分可能在光照下发生降解,因此需要在避光条件下保存。尤其是含有敏感成分的培养基,更需注意防止光照。
4.保持密封
干燥剂:大多数培养基在湿度较高的环境下容易变质,应保持存放环境的相对干燥。可以使用干燥剂来帮助控制湿度。
密封容器:培养基容器必须在使用后重新密封,以防止空气和水汽进入,影响培养基的质量。
5.ATCC培养基定期检查
检查保质期:在存放期间,应定期检查培养基的保质期,确保在使用前没有过期。过期的培养基可能会失去营养或出现污染,影响实验结果。
观察外观:定期检查培养基的颜色、气味和透明度等外观特征,若发现异常,应及时处理,以免影响实验效果。
6.正确标记
标签信息:在存放培养基时,应在容器上标明相关信息,如名称、配制日期、有效期等,以便使用时能够准确识别。
分类存放:不同类型的培养基应分类存放,例如血琼脂培养基和巧克力培养基应分开放置,避免混淆。