分散酶II可应用于组织的解离

分散酶II能快速有效且温和的破坏组织细胞外基质释放单细胞培养物(原代细胞培养物)或收集已培养的细胞将其转移到新的培养基质上(传代培养)。

分散酶II可应用于组织的解离，具体步骤如下：

1、用无菌的小刀或者剪刀将组织剪成合适大小的组织块。

2、用无菌PBS清洗组织块。

3、向上述组织块中加入Dispase II溶液( 工作浓度为0.6-24U/ml)，并确保组织块全部浸没于Dispase溶液中。

4、37°C孵育，孵育过程缓慢搅拌直至组织块全部解离。（若*一次使用该酶，可通过细胞计数来确定需要的总孵育时间。一般对于较难解离组织，1h即可达到分离目的，但更长时间(如数小时)的孵育也不会明显影响细胞活性。）

5、如有需要，可将上述消化产物通过无菌不锈钢网筛过滤，以分开单细胞与残留的组织块。或者待大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞，若是需要，换用新鲜dispase溶液以进一步解离残留组织。

6、离心沉淀细胞，倒掉酶溶液;

7、用培养基重悬细胞沉淀，并于常规条件下培养细胞。